游離脂肪酸含量試劑盒操作詳情

游離脂肪酸，簡稱：FFA，存在于人體內(nèi)的脂質(zhì)，大致可以分為膽固醇、中性脂肪（三酸甘油脂）、磷脂質(zhì)等3種。游離脂肪酸是中性脂肪分解成的物質(zhì)。當(dāng)肌肉活動(dòng)所需能源--肝糖耗盡時(shí)，脂肪組織會(huì)分解中性脂肪成為游離脂肪酸來充當(dāng)能源使用。所以，游離脂肪酸可說是進(jìn)行持久活動(dòng)所需的物質(zhì)。


產(chǎn)品內(nèi)容：

提取液：液體 100 mL×1 瓶，室溫保存。

試劑一：自備。實(shí)驗(yàn)前一天，取一個(gè)玻璃瓶，按照正庚烷：無水甲醇：；lv仿=24:1:25 的比例配置（自備），蓋緊后混勻，室溫保存。

試劑二：液體 6 mL×1 瓶，室溫保存。

試劑三：粉劑×2 瓶，4℃保存。臨用前在試劑瓶中加入 13mL 無水乙醇，充分溶解，4℃可保存一周。

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 瓶，10mg 棕櫚酸，室溫保存。臨用前把試劑轉(zhuǎn)移到 10 mL 玻璃瓶中，加入 7.8mLlv仿充分溶解，即為 5μmol/mL 的棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

產(chǎn)品說明：

FFA 既是脂肪水解的產(chǎn)物，又是脂肪合成的底物。血清中 FFA 的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。FFA 與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽，并溶于lv仿；利用銅試劑法測(cè)定銅離子含量，即可推算出游離脂肪酸含量。

自備儀器和用品：

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、一個(gè) 25 mL 玻璃瓶、一個(gè) 15mL 玻璃瓶、正庚烷、無水甲醇、lv仿、無水乙醇和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣品中 FFA 提取：

1、血清中 FFA 測(cè)定：將所取血液，室溫靜置 1 h 后，于 4 ℃ 離心機(jī) 3500 rpm 離心 15min，取上層血清置于-20℃冰箱保存，待測(cè)

2、組織中 FFA 含量測(cè)定：組織用生理鹽水沖洗干凈后，用吸水紙吸取表面水分，稱取約 0.1g，加入 1 mL 提取液，勻漿后，8000rpm，4℃離心 10min，取上清液，置冰上待測(cè)。

二、測(cè)定：

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長到 550 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在 37℃水浴中預(yù)熱 30 min 以上。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成 1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。

游離脂肪酸含量試劑盒操作詳情