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植物電穿孔緩沖液的相關操作說明

更新時間:2019-05-20      瀏覽次數:1322

植物電穿孔緩沖液主要由PBS、甘露糖醇、氯化鈣組成。主要用于植物電穿孔。規格為100ml,保存方式為4℃,6個月。
植物電穿孔緩沖液配制原理:
1.由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。
2.當向這種溶液中加入一定量的強酸時,H+離子基本上被A-離子消耗;所以溶液的pH值幾乎不變;當加入一定量強堿時,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。
3.在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時,緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。

植物電穿孔緩沖液操作步驟:
1.小心切取植物材料,使其達到5mm的條狀。植物材料置于原生質體溶液中溫育,30℃ 旋轉搖床3~6h,以便獲得原生質體細胞; 
2.經80μm尼龍網過濾除去沉渣,流入15ml離心管。用4ml植物電穿孔緩沖液淋洗篩 網并收入離心管;
3.離心,棄上清;
4.用植物電穿孔緩沖液重復洗滌;
5.計數細胞,按1.5~2×106細胞/ml的密度將原生質體細胞重懸于植物電穿孔緩沖液中;
6.進行電穿孔轉染。

植物電穿孔緩沖液配制原理注意事項:
1.注意無菌操作,避免微生物污染;
2.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套;
3.請嚴格按照產品說明書上的要求進行規范化的操作。

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